Зачем нужен
Каталаза защищает клетку от перекиси водорода, которая образуется при дыхании кислородом. По её наличию различают, например:
| Каталазоположительные | Каталазоотрицательные |
|---|---|
| стафилококки, микрококки | стрептококки, энтерококки |
| листерии | лактобациллы |
| большинство энтеробактерий, псевдомонады | клостридии (большинство) |
| бациллы, коринебактерии |
Реактив
3-процентный раствор перекиси водорода. Перекись разлагается при хранении, поэтому её держат в тёмной посуде в холодильнике и регулярно проверяют на контрольных штаммах. Для части задач, например при идентификации микобактерий, используют более концентрированные растворы — по методике.
Как ставить
На стекле:
- Нанесите на чистое предметное стекло каплю 3-процентной перекиси водорода.
- Одноразовой пластиковой петлёй или деревянной палочкой внесите в каплю часть изолированной колонии из 18–24-часовой культуры. Нихромовую петлю в перекись не опускайте: металл сам даёт пузырьки.
- Сразу смотрите: быстрое образование пузырьков — положительный результат.
В пробирке — несколько капель перекиси наносят на скошенный агар с выросшей культурой. Этот вариант безопаснее: пузырьки, лопаясь, образуют аэрозоль с бактериями, а в пробирке он остаётся внутри.
На стекле пузырьки дают аэрозоль при любом порядке нанесения колонии и перекиси, поэтому стекло сразу накрывают крышкой чашки Петри. При работе с потенциально патогенными культурами тест ставят в боксе или в пробирке.
Контроль
Каждую новую партию перекиси и не реже установленной в лаборатории периодичности проверяют на двух культурах: положительной (например, Staphylococcus aureus) и отрицательной (например, Enterococcus faecalis).
Ложные результаты
| Ошибка | Результат | Почему |
|---|---|---|
| колонию взяли с кровяного агара вместе со средой | ложноположительный | эритроциты содержат собственную каталазу |
| нихромовая или железная петля | ложноположительный | металл сам разлагает перекись |
| слишком старая культура | ложноотрицательный | фермент теряет активность |
| старая или разложившаяся перекись | ложноотрицательный | реактив не работает |
| единичные пузырьки через минуту | спорный | слабая реакция; учитывайте только быстрое бурное образование пузырьков |
Колонию с кровяного агара брать можно — но аккуратно, с поверхности, не захватывая среду. Надёжнее пересеять культуру на среду без крови.
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.