Что такое номер WDCM
Один и тот же штамм хранится в разных коллекциях под разными номерами: в американской ATCC, британской NCTC, немецкой DSM, французской CIP и других. Чтобы стандарты не зависели от конкретной коллекции, Всемирный центр данных по микроорганизмам ведёт каталог, где каждому эталонному штамму присвоен номер WDCM и перечислены его номера во всех коллекциях. На номера WDCM ссылается, в частности, ГОСТ ISO 11133-2016.
Купить можно штамм любой коллекции — главное, чтобы номер соответствовал требуемому номеру WDCM.
Распространённые тест-штаммы
| Микроорганизм | ATCC | WDCM | Где часто используют |
|---|---|---|---|
| Escherichia coli | 25922 | 00013 | контроль сред для энтеробактерий, контроль определения чувствительности |
| Escherichia coli | 8739 | 00012 | фармакопейные испытания, контроль сред |
| Staphylococcus aureus | 25923 | 00034 | контроль сред, определение чувствительности |
| Staphylococcus aureus | 6538 | 00032 | фармакопейные испытания, дезинфектанты |
| Staphylococcus epidermidis | 12228 | 00036 | контроль специфичности сред для стафилококков: растёт, но без зоны просветления, как у S. aureus |
| Pseudomonas aeruginosa | 27853 | 00025 | контроль сред, определение чувствительности |
| Pseudomonas aeruginosa | 9027 | 00026 | фармакопейные испытания |
| Enterococcus faecalis | 29212 | 00087 | контроль сред для энтерококков, определение чувствительности |
| Enterococcus faecalis | 19433 | 00009 | контроль сред для энтерококков |
| Salmonella Typhimurium | 14028 | 00031 | контроль сред для сальмонелл |
| Salmonella Enteritidis | 13076 | 00030 | контроль сред для сальмонелл |
| Bacillus subtilis | 6633 | 00003 | фармакопейные испытания |
| Bacillus cereus | 11778 | 00001 | контроль сред для B. cereus |
| Clostridium perfringens | 13124 | 00007 | контроль сред для клостридий |
| Clostridium sporogenes | 19404 | 00008 | контроль анаэробных сред |
| Candida albicans | 10231 | 00054 | контроль сред для грибов, фармакопейные испытания |
| Aspergillus brasiliensis | 16404 | 00053 | контроль сред для плесеней, фармакопейные испытания |
| Saccharomyces cerevisiae | 9763 | 00058 | контроль сред для дрожжей |
Таблица — для ориентира. Перед закупкой сверяйте номер с актуальным каталогом WDCM и с требованиями методики: для конкретной среды стандарт задаёт и штамм, и ожидаемую реакцию.
От коллекции до рабочей культуры
Международный стандарт ISO 11133 (в России — ГОСТ ISO 11133-2016) различает четыре ступени (в переводах их называют по-разному):
- Эталонный (контрольный) штамм — из признанной коллекции, с сертификатом.
- Эталонные исходные культуры — серия одинаковых культур, полученных одним пересевом из эталонного штамма; хранится длительно в замороженном или лиофилизированном виде.
- Исходная культура — первый пересев эталонной исходной культуры.
- Рабочая культура — получена из эталонной исходной культуры или исходной культуры и используется в повседневном контроле.
ГОСТ ISO 11133-2016 не называет предельного числа пересевов, но требует их учитывать, чтобы не допускать лишних: при многократных пересевах штамм может изменить свойства, и контроль потеряет смысл. Конкретные пределы задают другие документы: МУК 4.2.2316-08 для контроля питательных сред — не более трёх последовательных пересевов, фармакопейные испытания по USP — не более пяти пассажей от культуры коллекции. Подробнее — в статье о хранении и пересеве культур.
Хранение
- Длительно — при −70 °C и ниже в криопробирках с бусинами и криопротектором или в лиофилизированном виде.
- Рабочие культуры — на скошенном агаре при 2–8 °C, сроки — по документам лаборатории.
- Каждый пересев записывают в журнал: штамм, номер пассажа, дата, среда, исполнитель, проверка чистоты и типичных свойств.
Где взять
- государственные коллекции микроорганизмов: Всероссийская коллекция микроорганизмов (ВКМ), Государственная коллекция патогенных микроорганизмов и клеточных культур «ГКПМ-Оболенск», Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов (ВКПМ) и другие;
- поставщики, которые распространяют штаммы зарубежных коллекций по лицензии, в том числе в виде количественных лиофилизированных культур с известным числом КОЕ — удобны для контроля ростовых свойств.
Работа с тест-штаммами — это работа с микроорганизмами определённой группы патогенности. Нужны разрешительные документы и условия работы, соответствующие требованиям СанПиН 3.3686-21.
Типичные ошибки
- рабочую культуру годами пересевают «с пробирки на пробирку»;
- нет записей о пассажах — нельзя доказать эксперту, что штамм не изменился;
- закупают штамм с подходящим названием, но другим номером: свойства штаммов одного вида различаются;
- не проверяют чистоту культуры после размораживания.
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.