Почему вообще есть границы
Нижняя граница. Число колоний на чашке подчиняется законам случайного распределения: при 10 колониях относительная случайная погрешность около 30 %, при 100 — около 10 %. Чем меньше колоний, тем хуже результат отражает пробу.
Верхняя граница. Когда колоний много, они сливаются, мелкие закрываются крупными, а рост одних подавляет рост других. Подсчёт становится заниженным и трудным.
Счётный диапазон — компромисс между этими эффектами. Он зависит от размера чашки, характера колоний и среды, поэтому в разных документах он разный.
Какие диапазоны встречаются
| Диапазон | Где встречается |
|---|---|
| не более 300 колоний и хотя бы на одной чашке не менее 10 | ГОСТ ISO 7218-2015 — общие правила пищевой микробиологии, на них ссылаются методы ISO |
| не более 150 характерных колоний (при общем числе не более 300) | ГОСТ ISO 7218-2015 — для подсчёта характерных колоний на селективных средах |
| от 15 до 300 | действующие ГОСТ 10444.15-94 (КМАФАнМ) и ГОСТ ISO 4833-2015 (перевод ISO 4833:2003), а также прежняя редакция ISO 7218 |
| от 25 до 250 | американское руководство FDA BAM для пищевой продукции |
| от 30 до 300 | американское руководство Standard Methods для гетеротрофных бактерий в воде (глубинный посев, метод 9215 B); часто встречается в учебниках и онлайн-калькуляторах |
| особые пределы | методы мембранной фильтрации, посев воздуха, отдельные показатели воды |
Последнее слово всегда за методикой, по которой выполняется анализ: если она задаёт свой диапазон, применяют его.
Правила ГОСТ ISO 7218-2015 коротко
- Для каждого разведения сеют одну или две чашки.
- Отбирают чашки двух последовательных разведений, на которых не более 300 колоний, и хотя бы на одной из отобранных чашек — не менее 10.
- Число микроорганизмов считают как взвешенное среднее по формуле N = ΣC / (V × (n₁ + 0,1·n₂) × d).
- Результат округляют до двух значащих цифр.
- Если колоний меньше нижней границы, результат записывают как оценочный или как «менее …»; если чашки переросли — как «более …».
Все эти случаи разобраны по шагам в калькуляторе КОЕ, а какие разведения сеять, чтобы попасть в диапазон, подскажет планировщик разведений.
Частые вопросы
На одной чашке разведения 320 колоний, на другой 280 — что делать? По приложению D ГОСТ ISO 7218-2015 отбирают отдельные чашки, а не разведения целиком: чашку с 320 колониями не берут, а чашку с 280 берут. Для этого разведения в формуле n₁ = 1, а следующее разведение входит в расчёт обеими чашками. Если чашки одного разведения сильно расходятся, результат оценивает опытный микробиолог и при необходимости бракует. Так же считает калькулятор КОЕ, а в шагах расчёта показывает, какие чашки взяты и какие нет. Другие пограничные случаи — например, когда на первом разведении чуть больше 300 колоний, а на втором меньше 10, — разобраны в том же приложении D.
Можно ли считать чашку с 9 колониями? Если на другой отобранной чашке не менее 10 — да, она входит в сумму. Если на всех чашках меньше 10 — результат будет оценочным.
Онлайн-калькулятор считает по 30–300 и простой формуле — это ошибка? Для учебных задач — нет, но для протокола по ГОСТ ISO 7218-2015 результат может отличаться: стандарт использует взвешенное среднее двух разведений, а не одно разведение.
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.