Какая точность нужна
Единого допуска «для всех термостатов» нет. По ГОСТ ISO 7218-2015 (п. 5.8.1) термостат должен поддерживать температуру, равномерно распределённую по камере, в пределах максимально допустимого отклонения, которое указано в методе испытания. Поэтому допуск ищут в методике — в разделе об оборудовании или об инкубации.
| Метод | Режим инкубации | Где указано |
|---|---|---|
| ОМЧ питьевой воды | (37 ± 1) °C, (24 ± 2) ч | МУК 4.2.3963-23, пп. 5.1–5.2 |
| КМАФАнМ в пищевой продукции | (30 ± 1) °C, (72 ± 3) ч | ГОСТ ISO 4833-2015, пп. 6.2 и 9.2.8 |
Бывают и более узкие допуски: в ГОСТ ISO 7218-2015 (п. 5.28.2) как пример разобран допуск ±0,5 °C. Если в одном термостате инкубируют посевы по нескольким методам, ориентируйтесь на самый строгий из их допусков.
Допуск относится ко всем местам, где стоят посевы. Регулятор измеряет температуру в одной точке камеры, и его показание ещё не означает, что на верхней полке у дверцы столько же.
Картирование
Картирование — одновременное измерение температуры в разных точках рабочего объёма. ГОСТ ISO 7218-2015 (п. 5.8.4) требует проверять стабильность и однородность температуры несколькими термометрами или термопарами известной точности и по результатам выбирать рабочий диапазон и место для контрольного термометра.
Общий порядок:
- Определяют рабочий объём — полки и зоны, где будут стоять посевы (п. 5.8.2).
- Датчики раскладывают по всему объёму: на верхней и нижней полке, в центре, ближе к стенкам и к дверце. Полезно, чтобы загрузка при этом была такой, как в обычной работе.
- После выхода на режим температуру регистрируют в течение времени, заданного программой проверки, — так видны и разброс по объёму, и колебания во времени.
- Крайние значения сравнивают с допуском метода и решают, какие зоны не использовать и где поставить контрольный термометр.
Пример из стандарта: при заданных (37 ± 1) °C в разных точках камеры получили от 36,8 до 37,3 °C, то есть самая холодная точка на 0,2 °C ниже заданной температуры, самая тёплая — на 0,3 °C выше. Чтобы весь объём оставался в пределах (37 ± 1) °C, рабочий диапазон термостата сужают до 36,2–37,7 °C.
Картирование повторяют после каждого существенного ремонта или переделки термостата (п. 5.8.4). Термостат воспроизводит условия испытания, поэтому его относят к испытательному оборудованию (определение — в ГОСТ Р 8.568-2017). Этот стандарт задаёт порядок аттестации: первичной до начала эксплуатации, периодической с интервалом, установленным при первичной, и повторной после ремонта, модернизации или перемещения. Аттестацию испытательного оборудования прямо требует СанПиН 3.3686-21 (п. 185) для лабораторий, работающих с патогенными биологическими агентами (ПБА). К ним относятся и санитарно-микробиологические лаборатории: исследования на санитарно-показательные микроорганизмы СанПиН считает работой с ПБА IV группы (п. 311). Аккредитованная лаборатория, кроме того, указывает в сведениях об оснащённости дату и номер документа об аттестации испытательного оборудования (критерии аккредитации, приказ Минэкономразвития России № 707).
Ежедневный контроль
- Температуру проверяют как минимум каждый рабочий день (ГОСТ ISO 7218-2015, п. 5.8.4). Стандарт предлагает термометр с отметкой максимума и минимума или самописец: однократная утренняя запись не покажет ночной перегрев.
- Шарик термометра или датчик держат в ёмкости с глицерином, жидким парафином или полипропиленгликолем (пп. 5.8.4, 5.28.2). Жидкость сглаживает скачки при открывании дверцы.
- Неопределённость измерения должна быть хотя бы в четыре раза меньше допуска: при ±1 °C — не более 0,2 °C, при ±0,5 °C — не более 0,1 °C (п. 5.28.2). Термометр с ценой деления 1 °C для этого не годится.
- Контрольные термометры калибруют по всему диапазону перед первым использованием и не реже раза в пять лет, а между калибровками проверяют по одной точке, например по точке таяния льда. Рабочие термометры сверяют по точке таяния льда и (или) с контрольным термометром (п. 5.28.3). Калибровка должна быть прослеживаемой к эталонам; для аккредитованной лаборатории это требование ГОСТ ISO/IEC 17025-2019 (п. 6.5).
- Термометр с разорвавшимся столбиком использовать нельзя.
В журнал записывают дату, время, показание, максимум и минимум, подпись, а в шапке указывают допустимый диапазон. Бланк журнала контроля температуры можно распечатать в разделе «Журналы».
Загрузка и расстановка чашек
- Чашки после посева переворачивают и сразу ставят в термостат (ГОСТ ISO 7218-2015, п. 10.2.5).
- В стопке при аэробной инкубации обычно не больше шести чашек; между стопками и до стенок — не меньше 25 мм. В термостатах с циркуляцией воздуха стопки могут быть выше и плотнее, но тогда равномерность температуры нужно проверить (п. 10.2.5).
- Методика может быть строже: для ОМЧ воды МУК 4.2.3963-23 (п. 5.2) разрешает ставить не больше четырёх чашек в стопку.
- Не набивайте камеру до отказа: при полной загрузке питательные среды гораздо дольше выходят на нужную температуру (п. 5.8.2).
- Дверцу не держат открытой долго; загрузку и выгрузку проводят быстро, их длительность рекомендуется отслеживать (пп. 5.8.2, 10.2.5).
- Термостат защищают от солнца. Если в комнате бывает так же тепло, как в камере, или теплее, нужен термостат с охлаждением (п. 5.8.2).
- Камеру регулярно моют и обрабатывают, при необходимости чистят вентиляцию от пыли (п. 5.8.3).
Если температура вышла за пределы
Небольшие колебания при загрузке и выгрузке неизбежны (п. 10.2.5) — важно, чтобы они были короткими. Если же контрольный термометр показывает выход за допуск:
- Перепроверьте показание вторым термометром: возможно, неисправен сам термометр или дверца долго была открыта.
- Выясните, когда началось отклонение: по регистратору, отметкам максимума и минимума, последней нормальной записи.
- Выведите термостат из работы и пометьте его. По ГОСТ ISO/IEC 17025-2019 (п. 6.4.9) оборудование, которое не отвечает установленным требованиям, изолируют или маркируют как неработающее, пока его исправность не подтвердят. Посевы по возможности перенесите в проверенный термостат.
- Оцените, как отклонение повлияло на посевы: насколько и как долго температура была вне допуска. Оставить результат или повторить испытание, решают по процедуре управления несоответствующей работой (п. 7.10 того же стандарта).
- После ремонта повторите картирование и, если требуется, аттестацию — только потом возвращайте термостат в работу.
- Запишите, что случилось, что проверили, какие пробы затронуты и какое решение принято.
Типичные ошибки
| Ошибка | Чем опасна |
|---|---|
| контроль только по дисплею термостата | дисплей показывает одну точку камеры, а не весь рабочий объём |
| термометр лежит на полке без жидкости | показание прыгает при каждом открывании дверцы |
| в журнале каждый день одно и то же число без максимума и минимума | не видно перегрева или охлаждения в нерабочее время |
| стопки до потолка и вплотную к стенкам | чашки в разных местах инкубируются при разной температуре |
| после ремонта сразу ставят посевы | распределение температуры могло измениться |
| термостат у окна или у батареи | перегрев днём и летом |
Нарушенный режим инкубации меняет число колоний, а с ним и результат подсчёта. Как считать колонии и какие чашки брать в расчёт — в статье «Сколько колоний считать на чашке».
Источники
- ГОСТ ISO 7218-2015 на meganorm.ru — пп. 5.1, 5.8, 5.28 и 10.2.5: требования к термостату и его проверке, пример расчёта рабочего диапазона, термометры и их калибровка, расстановка чашек
- ГОСТ ISO 4833-2015, официальное издание (скан, files.stroyinf.ru) — пп. 6.2 и 9.2.8: режим (30 ± 1) °C, (72 ± 3) ч и не более шести чашек в стопке
- МУК 4.2.3963-23 на docs.cntd.ru — пп. 5.1–5.2: режим инкубации для ОМЧ и не более четырёх чашек в стопке
- ГОСТ Р 8.568-2017 на meganorm.ru — определение испытательного оборудования, первичная, периодическая и повторная аттестация
- ГОСТ ISO/IEC 17025-2019 на meganorm.ru — пп. 6.4.9, 6.5 и 7.10: вывод неисправного оборудования из работы, метрологическая прослеживаемость, управление несоответствующей работой
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.