Посев воздуха: седиментационный и аспирационный методы

Два метода

КОЕ — колониеобразующие единицы, подробнее — в словаре. МУК 4.2.734-99 называют пассивный метод по сути качественным: он показывает спектр микроорганизмов, но не их концентрацию. ГОСТ ИСО 14698-1-2005 добавляет, что седиментационные чашки не дают общего числа жизнеспособных частиц в воздухе, зато позволяют оценить, сколько их попадёт на продукт за известное время на известную площадь.

Практический вывод: если результат сравнивают с нормативом в КОЕ/м³, нужен аспирационный метод. Седиментационный остаётся вспомогательным — для критических точек, где открыт продукт или идёт посев.

Медицинские организации: МУК 4.2.4180-25

С 30 июля 2026 года санитарно-микробиологические исследования в медицинских организациях проводят по МУК 4.2.4180-25.

• Только аспирационный метод. Седиментационный для исследования воздуха не применяется (п. 2.3).
• Объём пробы. 100 дм³ (литров) — для общего микробного числа (ОМЧ), дрожжевых и плесневых грибов; 250 дм³ — для «патогенной бактериальной микрофлоры». Из бактериальных показателей воздуха, кроме ОМЧ, МУК называют только S. aureus (п. 2.1).
• Обработка прибора. При переносе в другое помещение наружные поверхности обрабатывают дезинфицирующим средством, внутренние — столик, стыки, крышку — 70 % спиртом. Следующую пробу отбирают, когда поверхности высохнут.

Колонии грибов считают на двух чашках и берут среднее. Учитывают только первичный рост, а чашки не упаковывают герметично, не пересушивают и не трясут, чтобы споры не разлетелись (п. 2.6). Как выглядят колонии S. aureus и почему радужный венчик есть не у всех штаммов, рассказано в статье о желточно-солевом агаре.

Нормативы. С 1 сентября 2026 года действуют СП 2.1.4284-26: они заменили СП 2.1.3678-20, на которые ещё ссылаются МУК. Помещения медицинских организаций делят на классы чистоты А–Г по ОМЧ в 1 м³. Предельные значения до начала и во время работы приведены в приложении 3 к СП 2.1.4284-26. В помещениях классов А и Б золотистого стафилококка в воздухе быть не должно, в классах В и Г он не нормируется (подп. 6 п. 24).

Пересчёт на 1 м³

КОЕ/м³ = N × 1000 / V, где N — число колоний на чашке, V — объём пробы в литрах (дм³).

• 100 л: число колоний умножают на 10.
• 250 л: умножают на 4 — например, 7 колоний дают 28 КОЕ/м³.

У многосопловых импакторов при большом числе колоний несколько частиц могут попасть через одно сопло в одну точку и дать одну колонию. Тогда число колоний пересчитывают в наиболее вероятное число КОЕ по формуле или таблице из руководства к прибору. В МУК 4.2.734-99 формула и таблица даны для пробоотборника с 367 соплами: при 35 колониях и меньше поправка не нужна, при большем числе — берут значение из таблицы.

Где седиментационный метод остаётся

• Контроль бокса при посевах на стерильность. По п. 6.11 МУК 4.2.4180-25 на рабочий стол ставят 2 чашки с МПА (или агаром Хоттингера, СПА, ГРМ-агаром) и открывают их на 15 минут. Затем чашки инкубируют при (36 ± 2) °C (48 ± 2) ч. Допускается не больше трёх колоний неспорообразующих сапрофитов.
• Чистые помещения производств. МУК 4.2.734-99 указывают экспозицию от 15 минут до нескольких часов, но при долгой экспозиции среда подсыхает. Метод советуют сочетать с активным, а чашки ставить в точках «наихудших условий» и, например при розливе, как можно ближе к наполняющим иглам. В зонах классов А и В при экспозиции 30 минут во время работы допускается рост одной, редко двух колоний.
• Чувствительность. ГОСТ ИСО 14698-1-2005 советует брать большие чашки (например, диаметром 14 см) и удлинять экспозицию, защищая среду от высыхания.

Производственная среда: МУК 4.2.734-99

Документ написан в основном для производителей медицинских иммунобиологических препаратов. Его можно использовать как руководство по общему микробиологическому контролю чистых помещений: воздух, поверхности, руки и одежда персонала.

• Воздух проверяют во время работы, не меньше чем в трёх точках помещения.
• Бактерии растят на среде № 1 по Государственной фармакопее XI издания при 30–35 °C 48 ч, дрожжи и плесени — на агаре Сабуро при 20–25 °C 72 ч. Разлитые чашки заранее выдерживают сутки при 30–35 °C — проверяют стерильность.
• Объём пробы подбирают опытным путём, чтобы колонии были отдельными: оптимально менее 300 на чашке и менее 30 на мембране.
• Выделенные микроорганизмы как минимум описывают по виду колоний и окраске по Граму. Это помогает найти источник: стафилококки обычно попадают от людей, споровые бациллы и плесени — с пылью.
• Для каждой зоны устанавливают уровень тревоги (ранний сигнал, повод для дополнительного контроля) и уровень действия (требует немедленных корректирующих мер).

Чистые помещения: частицы и микробы — разные измерения

• ГОСТ Р ИСО 14644-1-2017 классифицирует чистоту воздуха только по концентрации аэрозольных частиц размером от 0,1 до 5 мкм, измеренной лазерным счётчиком частиц. Классы — от 1 ИСО до 9 ИСО. При классификации указывают состояние помещения: построенное, оснащённое или эксплуатируемое. Для описания биологических свойств частиц стандарт не применяют, поэтому класс ИСО ничего не говорит о микроорганизмах.
• ГОСТ ИСО 14698-1-2005 задаёт принципы контроля биозагрязнений: зоны риска, план отбора проб, выбор и проверку пробоотборников. Биозагрязнение воздуха выражают числом жизнеспособных частиц в 1 м³. Пределы для отдельных отраслей стандарт не устанавливает. Импинжеры стандарт считает непригодными для отбора жизнеспособных аэрозольных частиц: у них мал объём пробы, низка скорость отбора и можно разбить скопления клеток.

Типичные ошибки

Источники

• МУК 4.2.4180-25, полный текст (meganorm.ru) — аспирационный метод, объёмы проб, обработка прибора, среды и режимы для ОМЧ, S. aureus и грибов (пп. 2.1–2.6), контроль воздуха в боксе (п. 6.11)
• СП 2.1.4284-26, текст постановления от 02.06.2026 № 20 (legalacts.ru) — вступление в силу с 01.09.2026, утрата силы СП 2.1.3678-20, классы чистоты (приложение 3), S. aureus в помещениях классов А и Б (п. 24)
• МУК 4.2.734-99 (files.stroyinf.ru) — область применения, пассивный и активный методы, экспозиция чашек, среды и инкубация, объём пробы, таблица поправок для импактора, уровни тревоги и действия
• ГОСТ ИСО 14698-1-2005 (meganorm.ru) — область применения, седиментационные чашки и активные пробоотборники (приложения А и С), единицы выражения результата
• ГОСТ Р ИСО 14644-1-2017 (files.stroyinf.ru) — классификация по частицам 0,1–5 мкм, классы 1–9 ИСО, состояния помещения, неприменимость к биологическим свойствам частиц

Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.