Как устроены среды
Каждая пробирка содержит пептонную воду, один углевод или многоатомный спирт — чаще всего глюкозу, лактозу, сахарозу, мальтозу или маннит — и кислотно-основный индикатор. Набор пробирок с разными углеводами и называют пёстрым рядом: после инкубации пробирки окрашены по-разному.
Среды бывают:
- жидкие — для учёта газа в пробирку помещают поплавок, маленькую перевёрнутую пробирку;
- полужидкие — с небольшим количеством агара; газ виден как пузырьки и разрывы столбика среды.
Индикаторы
| Индикатор | Исходный цвет | При образовании кислоты |
|---|---|---|
| Андреде | бесцветный или бледно-жёлтый | розовый или красный |
| бромтимоловый синий | зелёный или сине-зелёный | жёлтый |
Встречаются и другие индикаторы — цвет реакции всегда смотрите в инструкции к среде.
Как ставить и учитывать
- Засейте чистую культуру из изолированной колонии в каждую пробирку ряда.
- Обязательно оставьте незасеянную пробирку каждой среды как контроль цвета и стерильности.
- Инкубируйте при температуре и времени по методике — обычно 18–24 ч при 37 °C; поздние ферментаторы лактозы могут дать реакцию через несколько суток.
- Учитывайте: - кислота — изменение цвета индикатора; - кислота и газ — изменение цвета и газ в поплавке или разрывы среды; - нет реакции — цвет как у контрольной пробирки.
Записывают результаты знаками: «+» — кислота, «⊕» или «КГ» — кислота и газ, «–» — нет ферментации.
Типичные реакции
| Микроорганизм | Глюкоза | Лактоза | Маннит | Сахароза |
|---|---|---|---|---|
| Escherichia coli | кислота и газ | кислота и газ | + | вариабельно |
| Salmonella (большинство сероваров) | кислота и газ | – | + | – |
| Salmonella Typhi | кислота без газа | – | + | – |
| Shigella | обычно кислота без газа | – (S. sonnei — поздняя) | + (у S. dysenteriae –) | – (S. sonnei — иногда поздняя) |
Таблица показывает типичные реакции; встречаются атипичные штаммы, поэтому вид устанавливают по совокупности признаков, а для патогенов — с серологическим подтверждением.
Типичные ошибки
- Перегрев при стерилизации. Углеводы разрушаются при жёстком режиме, и среда может стать кислой ещё до посева. Режим для углеводных сред мягче, чем для обычных, — по инструкции производителя.
- Посев не чистой культурой — смесь бактерий даёт ложный пёстрый ряд.
- Слишком поздний учёт — некоторые бактерии после сбраживания углевода начинают расщеплять пептон, среда подщелачивается, и цвет возвращается; учитывайте реакции в сроки методики.
- Пузырёк воздуха в поплавке с самого начала принимают за газ — проверяйте поплавки до посева.
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.