Принцип
- Селективность. Висмут-сульфит и бриллиантовый зелёный подавляют грамположительные бактерии и большую часть кишечной палочки и других колиформ. Сальмонеллы к ним устойчивы.
- Дифференцирующий признак. Сальмонеллы образуют сероводород. Сероводород соединяется с железом среды в чёрный сульфид железа, а ионы висмута восстанавливаются до металлического висмута. Поэтому колонии и среда вокруг них чернеют, а вокруг колоний бывает металлический блеск.
Как выглядят колонии
| Микроорганизмы | Колонии |
|---|---|
| большинство сальмонелл, в том числе S. Typhi | чёрные или коричневые, часто с металлическим блеском; среда вокруг колонии чернеет |
| часть сальмонелл, например S. Paratyphi A | светлые, зеленоватые или серые, без почернения |
| протеи, цитробактеры | могут давать тёмные колонии, похожие на сальмонелл |
| кишечная палочка и колиформы | рост подавлен; отдельные колонии мелкие, зеленоватые или коричневые |
Чёрная колония на висмут-сульфит агаре — только подозрение. Её обязательно подтверждают биохимически и серологически.
Типичный вид колоний развивается не сразу: посевы просматривают через 24 ч и, если типичных колоний нет, повторно через 48 ч.
Приготовление
Висмут-сульфит агар не автоклавируют: перегрев разрушает селективные компоненты. Сухую среду обычно доводят до кипения при постоянном перемешивании, охлаждают и разливают, равномерно распределяя нерастворимый осадок. Точный режим, сроки и условия хранения готовых чашек — по инструкции производителя.
Где применяется
Среда используется для выделения сальмонелл из пищевой продукции, воды, клинического материала. Действующий стандарт на выявление сальмонелл в пищевой продукции — ГОСТ 31659-2024, построенный на международном методе: первую среду для высева задаёт стандарт, а вторую лаборатория выбирает сама — висмут-сульфит агар может быть такой средой. В прежних российских стандартах на сальмонеллы, например ГОСТ 30519-97, висмут-сульфит агар был одной из основных сред.
Типичные ошибки
- среду автоклавировали или долго кипятили — селективность потеряна, растёт посторонняя микрофлора;
- осадок не перемешан при разливе — среда неоднородна, на части чашек сальмонеллы не дают типичного почернения;
- посевы просмотрели только через сутки и пропустили медленно чернеющие колонии;
- чёрные колонии протеев приняты за сальмонеллы без подтверждения.
Материал подготовлен редакцией и ждёт проверки экспертами сообщества. Нашли неточность — напишите нам: исправления вносим и отмечаем дату.